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    獸用B超?;铙w采卵OPU應(yīng)用

    發(fā)布時(shí)間:2018年8月25日09:10   

    ?;铙w取卵(OPU)是繼體外受精(IVF)和胚移植(ET)之后的用于牛胚胎實(shí)驗(yàn)操作和生產(chǎn)繁殖的一項(xiàng)非常實(shí)用的胚胎工程技術(shù)。在20世紀(jì)80年代報(bào)道在B超監(jiān)視下施行0PU操作以來(lái),這項(xiàng)技術(shù)已被廣泛用于牛胚胎體外生產(chǎn)。OPU這項(xiàng)技術(shù)具有應(yīng)用廣泛、操作便利、高效和可重復(fù)性以及損傷小等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)聯(lián)合應(yīng)用OPU和IVF這兩種技術(shù),可充分提高良種牛的繁殖潛力和大量生產(chǎn)高質(zhì)量的胚胎。

    OPU操作參照前,母牛站立保定,2mL利多卡因尾硬膜外麻醉及1 mL“846合劑II”肌注。清除直腸糞便,清洗外陰部,并用0.1%新潔爾滅消毒外陰部。將帶有采卵針的探頭輕緩插到陰道穹隆,操作人員通過(guò)直腸隔著直腸壁將卵巢牽引至探頭端部,根據(jù)顯示屏圖像,調(diào)整卵巢和探頭的位置,使卵巢位于穿刺引導(dǎo)線上,推進(jìn)采卵針,同時(shí),用腳踏開關(guān)控制真空泵抽吸卵泡液,壓力在100 mmHg左右(除實(shí)驗(yàn)1.3.4),用DPBS(含3%BSA和%2 U/mL肝素)沖洗采卵針和導(dǎo)管,沖洗液也一同放人收集管。所有≥2 mm的卵泡均被穿刺,記錄穿刺卵泡的數(shù)量。

    OPU為體外生產(chǎn)高品質(zhì)牛胚胎提供了一個(gè)有價(jià)值的方法。隨著牛基因組測(cè)序的完成,以及新的數(shù)量性狀位點(diǎn)的繪制[26I,通過(guò)牛0PU回收具有清晰遺傳背景的卵母細(xì)胞,將為在分子水平上研究牛胚胎發(fā)育提供寶貴的實(shí)驗(yàn)材料,并最終為生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)牛胚胎產(chǎn)生顯著的經(jīng)濟(jì)和實(shí)用價(jià)值。

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